Chenoweth a cântat muzică gospel în copilărie în Oklahoma și a studiat operă înainte de a decide să urmeze o carieră în teatrul muzical. În 1997, a debutat pe Broadway în Steel Pier, câștigând un premiu Theatre World, înainte de a apărea în You're a Good Man, Charlie Brown și Wicked. Alte roluri pe Broadway includ The Apple Tree în 2006, Promises, Promises în 2010 și On the Twentieth Century în 2015, pentru care a primit o altă nominalizare la premiul Tony. De asemenea, a apărut în cinci producții City Center Encores!, Off-Broadway și în teatre regionale.
Chenoweth a avut propriul său sitcom, Kristin, în 2001 și a avut apariții ca invitat în multe emisiuni, inclusiv Sesame Street și Glee, pentru care a fost nominalizată la premiile Emmy în 2010 și 2011. În filme, a jucat în principal roluri de caracter, cum ar fi în Bewitched (2005), The Pink Panther (2006) și RV (2006). A jucat în filme de televiziune, cum ar fi Descendants (2015); a realizat lucrări vocale în filme animate precum Rio 2 (2014) și The Peanuts Movie (2015), împreună cu serialele animate Sit Down, Shut Up și BoJack Horseman; a prezentat mai multe ceremonii de premiere; și a lans