Latifah a jucat rolul lui Khadijah James în sitcomul Fox Living Single din 1993 până în 1998. Al treilea său album, Black Reign (1993), a devenit primul album al unei rapperițe solo care a primit o certificare RIAA și a generat single-ul "U.N.I.T.Y.", care a avut un impact semnificativ în creșterea conștientizării asupra violenței împotriva femeilor și obiectificării sexualității femeilor de culoare. Albumul a câștigat un premiu Grammy și a ajuns pe locul 23 în Billboard Hot 100. Apoi, a jucat în rolul principal din Set It Off (1996) și a lansat al patrulea său album, Order in the Court, pe 16 iunie 1998, cu Motown Records. Latifah a fost apreciată pentru rolul său de Matron "Mama" Morton în filmul muzical Chicago (2002), primind o nominalizare la Premiul Oscar pentru cea mai bună actriță în rol secundar.
Latifah a lansat al cincilea său album The Dana Owens Album în 2004. În 2007 și 2009, a lansat încă două albume de studio – Trav'lin' Light și Persona. A creat emisiunea de talk-show de zi The Queen Latifah Show, care a fost difuzată din 1999 până în 2001 și din nou din 2013 până în 2015, în syndication. A apărut în mai multe filme, cum ar fi Bringing Down the House (2003), Taxi (2004), Barbershop 2: Back in Business (2005), Beauty Shop (2005), Last Holiday (2006), Hairspray (2007), Joyful Noise (2012), 22 Jump Street (2014) și Girls Trip (2017) și a oferit vocea în seria de filme Ice Age. Latifah a primit aprecieri critice pentru interpretarea sa a cântăreței de blues Bessie Smith în filmul HBO Bessie (2015), pe care l-a co